023062 胆硫乳琼脂培养基(DHL)
(Deoxycholate Hydrogen Sulfide Lactose Agar)
用 途:
胆硫乳琼脂培养基用于肠道致病菌特别是沙门氏菌和志贺氏菌的选择性分离培养。(《中华人民共和国药典》2010年版)
原 理:
胨、牛肉浸出粉提供碳源、氮源、维生素和矿物质;乳糖、蔗糖为可发酵的糖类;去氧胆酸钠和枸橼酸钠抑制革兰氏阳性菌及大多数的大肠菌群和变形杆菌,但不影响沙门氏菌的生长;硫代硫酸钠和枸橼酸铁铵用于检测硫化氢的产生,使菌落中心呈黑色;中性红为pH指示剂,发酵糖产酸的菌落呈红色,不发酵糖的菌落为无色;琼脂是培养基的凝固剂。
培养基配方(每升):
胨 20.0g
乳糖 10.0g
牛肉浸出粉 3.0g
蔗糖 10.0g
去氧胆酸钠 1.0g
硫代硫酸钠 2.3g
枸橼酸钠 1.0g
枸橼酸铁铵 1.0g
中性红 0.03g
琼脂 16.0g
最终pH 7.2±0.1
使用方法:
1、称取胆硫乳琼脂培养基64.3g,加入蒸馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解,待冷至50℃左右,在无菌环境中,倾注灭菌平皿,待凝固后,备用。
2、用接种环取增菌液一环,划线接种于平板上。
3、将平板放入恒温培养箱中,30~35℃培养18~24h,必要时延长至40~48h。
4、观察结果。
质量控制:
本培养基倾注平皿待冷却后呈红色,质控菌株接种后。30~35℃培养18~24h,观察结果如下表:
贮 存:贮存于避光、阴凉干燥处,用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。
规 格:250g
参考文献:
1. 《中华人民共和国药典》2010年版,附录XI J 微生物限度检查。