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麦氏比浊法确定细菌浓度

发布时间:2014-07-10      浏览次数:3688    分享:

  麦氏比浊管是McFarland发明的一种用于微生物比浊的不同浊度的标准浊度管。具体的配制方法是根据硫酸和氯化钡的比例来定的,不同比例生成的硫酸钡沉淀的浓度不同,且都有定值。

  麦氏比浊管的配比如下:

操作方法

  1、轻摇标准试管。

  2、无菌操作将被测定的肉汤培养物加到与标准管相同直径(大小)的无菌试管中。

  3、以无菌操作向被测定试管加入无菌生理盐水(NaCl),直到浓度与所要求的标准管的浓度相同。

使用技巧

  1、直接用眼睛看(需要经验,误差较大)。

  2、找张白纸,打上平行直线,然后看(利用光在不同浓度液体折射不同)。

注意事项

  1、如果测定的肉汤培养物不澄清,由培养物的值减去未接种培养基的值来校正细菌浓度。4号管(肉汤培养物)-1号管(孵育过的未接种的肉汤管)=3号管(校正读数)。

  2、如果肉汤颜色很深,把未接种试管放在标准管的后面读数即可。

补充说明

  1、测定好的细菌,最好做一下梯度稀释涂布计数。

  2、此浓度是对应的大肠杆菌的浓度,如果是其他细菌,会有一定的差别,做过的几个菌差别都在一个数量级之内,适合于普通实验。

  3、此种方法测定的准确性不是很高,如果是对细菌数量要求较精确的,请用紫外分光光度计。

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