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细胞裂解大法哪家强?一文带你玩转细胞裂解!

发布时间:2025-08-29    浏览次数:25

初入实验室,你是不是对各种细胞裂解方法一脸懵?别担心,这篇干货满满的推文,带你轻松get细胞裂解的奥秘,从此实验路上不迷路!

01、细胞裂解,到底在裂什么?

简单来说,细胞裂解就是破坏细胞膜和细胞壁,释放出细胞内含物,比如蛋白质、核酸、细胞器等,为后续实验提供“原料”。

细胞裂解,到底在裂什么

02、细胞裂解方法大比拼

细胞裂解方法五花八门,但万变不离其宗,主要分为两大类:机械法和非机械法。

细胞裂解方法大比拼

1. 机械法:简单粗暴,效果显著

机械方法的优点是直接且易于操作,但有些方法较为苛刻,操作不当可能导致样品变性。

研钵和研杵这种方法适用于在液氮中冷冻的植物样品,通过研磨破碎细胞。优点是无需专业工具,且可添加溶剂提取代谢物。

微珠打磨使用玻璃珠或陶瓷珠通过机械剪切使细胞破裂,适用于各种细胞,且能保持细胞器完整。

超声处理利用超声波的空化作用破碎细胞,适用于植物和真菌细胞,是蛋白质纯化的首选方法。但需注意控制温度,避免样品过热。

匀浆法 通过挤压或旋转刀片剪切细胞,适用于纯化膜蛋白。法式压榨机可处理坚硬细胞,但维护复杂;转子-定子则快速高效,但处理量有限。

2. 非机械法:温和高效,各显神通

非机械方法通过添加化学物质或酶来裂解细胞,但后续可能需要去除这些物质以避免干扰。

冻融裂解法 通过反复冻融产生冰晶破坏细胞结构,方法温和但耗时。

高温裂解法 利用高温高压破坏细胞壁,方法快速但可能导致蛋白质变性。

酶解法 使用特定酶降解细胞壁和膜,方法温和且适用于分离原生质体,但需注意酶的去除。

化学裂解法 使用有机溶剂透化细胞壁和膜,适用于提取疏水分子,可与剪切力方法结合使用。

03、方法选择,因地制宜

没有最好的方法,只有最合适的方法!选择细胞裂解方法时,需要考虑以下因素:

细胞类型: 不同细胞的细胞壁/膜结构不同,需要选择不同的裂解方法。

目标产物: 不同的目标产物对裂解条件的要求不同,例如提取DNA需要避免剧烈震荡。

实验条件: 实验室设备、时间成本等因素也需要考虑。

04、小贴士:

裂解前,记得将细胞清洗干净,去除培养基等杂质。

裂解过程中,注意保持低温,防止蛋白降解。

裂解后,及时离心去除细胞碎片,获得上清液用于后续实验。

05、结语

细胞裂解是生物实验的基础步骤,掌握各种裂解方法的原理和优缺点,才能根据实验需求灵活选择,为后续实验保驾护航!希望这篇推文能帮助大家轻松玩转细胞裂解,在科研道路上乘风破浪!

本文由环凯转载自“Gene Diagnosis”公众号,版权归原作者所有,仅供学习参考,如有侵权请联系删除!

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