实战分享 | 悬浮细胞THP-1培养经验
发布时间：2023-06-20 浏览次数：184
平常实验室贴壁癌细胞养的比较多，针对悬浮细胞经验较少，经过多方咨询细胞方面的技术专家，也结合网上查询的经验贴，来自武汉大学的任老师最终能熟练培养悬浮细胞，顺利完成实验，并将研究成果发表在Journal of Controlled Release杂志上，下文是任老师的一些经验分享。
培养条件 ……
THP-1细胞的培养条件是：RPMI1640培养基＋10% FBS＋0.05mM β-巯基乙醇＋1% 双抗。
需要注意的是，THP-1细胞本身对血清比较敏感，所以我们采用的是价格比较贵的澳洲血清，培养基就是常用的RPMI1640培养基。
还有一点值得注意的是，这个细胞还需要添加β-巯基乙醇，β-巯基乙醇直接用的普诺赛细胞培养用的1000倍的储备液，使用时直接稀释1000倍加到培养基里就可以了。
培养方式 ……
一般我是采用透气T25细胞培养瓶，刚开始细胞密度比较低的时候我会竖着静置，瓶内加入5ml培养基，等个两三天观察一下细胞密度，如果细胞密度还可以就正常平放即可。
细胞传代 ……
针对细胞传代，有两种方式：
1：2-3天可以采取半量换液法，即瓶内有5ml培养基，加入5ml培养基混匀，取出5ml放入另一瓶中；
2：每周可以采取一次离心去除上清培养基，加入新鲜培养基，进行继续培养，如果细胞不着急用，不需要每天拿出来观察。同时也不需要每天换液，因为该细胞比较喜欢在酸性环境生长，因此待培养基变黄，再去换液或者传代。
以上便是任老师培养悬浮细胞THP-1的全部经验分享，希望能对大家有所帮助。我们也欢迎更多老师来稿，分享您的科研干货和心得体会！
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