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DMEM高糖、DMEM低糖、DMEM/F-12培养基到底啥差别?

发布时间:2023-04-04    浏览次数:128

DMEM高糖培养基

DMEM高糖培养基是在MEM培养基基础上改良而来,目前已广泛应用于各种细胞的培养。DMEM高糖培养基普遍应用于生长快、粘附性低的细胞。可用于多种哺乳动物原代细胞的培养,例如原代成纤维细胞、神经细胞、神经胶质细胞、HUVEC、平滑肌细胞等,也可以用于一些细胞系的培养,例如Hela、293、Cos-7及PC-12等。

DMEM低糖培养基

DMEM低糖培养基是一种应用十分广泛的培养基,可用于许多哺乳动物细胞培养。DMEM低糖培养基适合代谢作用慢、依赖性贴壁细胞的培养。

DMEM/F-12培养基

DMEM/F-12培养基是将DMEM与Ham's F-12培养基以1:1比例混合改良而来的。改良得到的DMEM/F-12培养基,营养成分更为丰富,含有更多种微量元素,广泛应用于多种哺乳类细胞的培养,也适用于低血清含量下哺乳动物细胞的培养以及克隆密度培养。已在DMEM/F-12之中成功培养的细胞包括MDCK、胶质细胞、成纤维细胞、人内皮细胞及小鼠成纤维细胞。

DMEM高糖与DMEM低糖的区别

低糖DMEM适合用于培养代谢作用较慢的细胞,高糖DMEM可以为细胞提供充足的碳源,适用于代谢快的细胞,如胚胎干细胞 (ES细胞) 等。同时,低糖的培养基有助于维持细胞的低分化状态,高糖培养基有助于细胞分化。此外,做单抗细胞融合时,一般也使用低糖培养基,因为高糖使细胞生长过快,不利于融合细胞的染色体稳定。

   知识延伸:培养基添加物的作用   

L-谷氨酰胺:L-谷氨酰胺在细胞培养时是重要的。脱掉氨基后,L-谷氨酰胺可作为培养细胞的能量来源、参与蛋白质的合成和核酸代谢。L-谷氨酰胺在溶液中经过一段时间后会降解,但是确切的降解率一直没有最终确定。L-谷氨酰胺的降解导致氨的形成,而氨对于一些细胞具有毒性。

GlutaMAX-I:即L-丙氨酰-L-谷氨酰胺,是 L-谷氨酰胺的衍生物,可替代细胞培养基中等摩尔的L-谷氨酰胺。该物质在水溶液中十分稳定,不会自发降解,而是通过细胞分泌的一种肽酶缓慢降解以释放谷氨酰胺,再被细胞吸收利用。

HEPES:HEPES 是一种优良的生物缓冲剂,对细胞无毒性作用,添加 HEPES 的培养基能够较长时间保持恒定的 pH 范围,可以有效地防止培养液 pH 波动较大对细胞生长产生不利的影响。一般进行克隆化培养时要添加HEPES。

酚红:酚红在培养基中被用来作为 pH 值的指示剂:中性时为红色,酸性时为黄色,碱性时为紫色。研究表明,酚红可以模拟固醇类激素的作用(特别是雌激素)。为避免固醇类反应,培养细胞,尤其是哺乳类细胞时,用不加酚红的培养基。由于酚红干扰检测,一些研究人员在做流式细胞检测时,不使用加有酚红的培养基。

丙酮酸钠:丙酮酸钠可以作为细胞培养中的替代碳源。尽管细胞更倾向于以葡萄糖作为碳源,但是,如果没有葡萄糖的话,细胞也可以代谢丙酮酸钠。

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