HEK293、293T还是293FT？这些293细胞搞懂了么？

自1977年以来，人胚肾细胞系HEK293（Human Embryonic Kidney 293）已成为生物技术以及生命科学领域应用最广泛的细胞工具之一。由于容易培养、转染效率高而成为实验常用的工具。

科研需求不断发展，从亲本HEK293细胞系中衍生出了一系列子代细胞系，其中293T、293FT最为常见。面对这些名称相似但功能各异的细胞系，很多研究者特别是刚接触病毒包装或者蛋白表达的新手都会感到困惑：它们之间到底有什么不同？如何根据具体实验目标做出最佳的选择呢？本文对三种细胞系的核心特征进行分析，并给出一个根据应用场景的选择指南。

一、HEK293（亲本细胞系）

该细胞系是用人5型腺病毒（Ad5）DNA剪切片段转染人胚肾细胞建立的。关键的是，HEK293细胞不表达SV40大T抗原（SV40 Large T-antigen）。

由于缺少大T抗原，转染进入HEK293细胞的质粒不能在细胞核内复制。基因表达水平完全由进入细胞的质粒拷贝数以及启动子强度决定。

在进行慢病毒或者逆转录病毒包装的时候，不能对包装质粒进行扩增，所以病毒蛋白的表达量比较少，最后导致病毒滴度比较低，因此不适合用于这种类型的病毒包装。

二、293T（标准大T抗原细胞系）

293T细胞系是将编码SV40大T抗原的基因稳定转染入亲本HEK293细胞中获得的，所以该细胞能持续表达此蛋白。

这个改变很有革命性，几乎所有的商业化的慢病毒和逆转录病毒包装系统里，它们的包装质粒，像psPAX2，都包含一段特殊的DNA序列，就是SV40复制起点。当这些质粒被转染进293T细胞之后，细胞内存在的大T抗原就能识别并结合到SV40复制起点上，进而触发质粒的附加体复制。这样做的结果是使包装质粒的拷贝数量大幅增加，从而让病毒结构和功能蛋白的表达量也跟着上升，最后导致病毒颗粒的组装效率以及产出量都显著提升。

也正是由于这个原因，293T细胞被公认为慢病毒和逆转录病毒包装的“金标准”，在全世界范围内被广泛使用。

三、293FT（优化型大T抗原细胞系）

293FT细胞系不是全新创建的，是从已有的293T细胞系中挑选出来的性能更好的一个克隆。同样稳定表达了SV40大T抗原，不过经过改良，生物特性更好。其包括：

• 293FT细胞的倍增时间一般比293T细胞要短，可以更快地达到适合转染的最佳密度，可以缩短实验的时间。

• 其贴壁性更强，这使得细胞在换液等操作时不易脱落，更适合多步骤或长时间培养的实验。

• 293FT细胞经过筛选，对于不同的转染试剂如脂质体类接受程度更高，能够使质粒更好的进入细胞。

 由于上述所有优点，293FT细胞在病毒产量方面一直优于标准的293T细胞，产量高出2-3倍，在需要达到最大性能、最高病毒滴度的应用中，293FT是最优选。

四、293细胞该如何选呢？

1、如果实验内容为： 常规瞬时基因表达或无SV40 ori的质粒扩增

推荐HEK293。在这种情况下，SV40大T抗原没有额外作用，基础且成本低的HEK293细胞系就足够。

2、如果实验内容为：标准慢病毒或逆转录病毒包装，需要得到可靠但不是最大化的病毒滴度

推荐293T。293T，是经过长期验证的病毒包装首选细胞，操作程序也较为成熟稳定。适用于大多数常规研究，它有着良好的性能和可靠性。

3、如果实验内容为：要得到最高的慢病毒滴度，比如用于难以被感染的原代细胞或者干细胞的转导，或者是制备体内注射用的病毒

推荐293FT。293FT是为了产生最多的病毒而设计的，生长速度快、转染效率高且细胞状态好，在具有挑战性的实验中是成功的关键保障。

4、如果实验内容为：利用含有SV40ori的载体做快速高效的重组蛋白瞬时表达

推荐293T或293FT。 这两个细胞系都可以使用T抗原来放大质粒，这样就可得到更多的蛋白产物.因为293FT转染效果比HEK293好很多，并且生长状态也更好一些，所以可能293FT会产生更多蛋白质。

参考：1. The most comprehensive introduction of HEK293 collections；Ubigene；2025

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