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食品中金黄色葡萄球菌检测

发布时间:2014-06-20      浏览次数:5692    分享:

  金黄色葡萄球菌检测在食品行业中至关重要。金黄色葡萄球菌是人类的一种重要病原菌,隶属于葡萄球菌属,有“嗜肉菌"的别称,是革兰氏阳性菌的代表,可引起许多严重感染。而对于金黄色葡萄球菌在速冻食品中的存在量,卫生部公布食品安全国家标准《速冻面米制品》,允许金葡菌限量存在,也对金黄色葡萄球菌检测做了相关规定。

实验设备耗材

  吸管(1ml、10ml)、恒温培养箱(36±1℃)、冰箱、均质器、振荡器、平皿、稀释瓶、天平、显微镜、接种棒等

培养基和试剂

  金黄色葡萄球菌检测需要用到试剂为:普通肉汤培养基、胰蛋白胨大豆肉汤、Baird-Prker琼脂平板、缓冲蛋白胨水(BP)、凝固酶试验冻干血浆

检验程序(非选择性增菌法)

  检样25g+225mlBP胨水

  10ml匀液+10ml双料胰胨肉汤

金黄色葡萄球菌检测操作步骤

  1.称取25g固体样品;吸取25mL液体样品,加入225mLBP胨水,固体样品研磨或置均质器中制成混悬液。

  2.吸取10mL上述混悬液,接种于10mL双料胰蛋白胨大豆肉汤中,置36±1℃培养2h。

  3.再加入20ml 含20%NaCl的单料胰蛋白胨大豆肉汤,置36±1℃培养24±2h。

  4.划线转种2个表面干燥的Baird-Parker琼脂平板上,36±1℃培养46±2h。

  5.挑取可疑菌落移种到肉汤培养基中,置36±1℃温箱培养24h。

  6.取肉汤培养物0.3ml同0.5ml凝固酶试验冻干血浆于8mm*100mm试管内充分混合,置36±1℃培养,定时观察是否有凝块形成,至少观察6h,以内容物完全凝固,使试管倒置或倾斜时不流动为阳性。试验中需同时做已知阳性和阴性对照。对可疑结果,应进行革兰氏染色、镜检和其他辅助试验。

  7.本菌为革兰氏阳性球菌,排列是葡萄球状,无芽胞,无荚膜,致病性葡萄球菌菌体较小,直径约为0.5~1μm。在Baird-Parker平板上为圆形、光滑凸起、湿润、直径为2~3mm,颜色呈灰色到黑色,边缘为淡色,周围为一混浊带,在其外层有一透明圈。用接种针接触菌落似有奶油树胶的硬度,偶然会遇到非脂肪溶解的类似菌落;但无混浊带及透明圈。

  8.报告结果,如发现有凝固酶试验阳性的菌落,即报告1g(ml)食品中有金黄色葡萄球菌存在,否则为阴性。

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