细胞培养容器如何选择？
发布时间：2025-11-04 浏览次数：9
在体外细胞培养过程中，培养容器是不可或缺的实验消耗品。它们不仅是细胞生长的“家园”，而且直接影响实验结果的稳定性和可重复性。
一、细胞培养容器的材质
细胞培养容器根据材质可分为 玻璃 和 塑料 两大类：
1. 玻璃材质
优点：易于细胞生长和附着，可反复清洁和消毒使用。
缺点：沉重、脆弱且昂贵。
2. 塑料材质
优点：成本低，一次性使用，降低污染风险。
缺点：通常是一次性消耗品，不能重复使用。
目前，实验室中最常用的塑料材料是聚苯乙烯PS具有成本低、化学惰性好的优点，是制作一次性培养容器的理想材料。然而，PS本身是疏水的，因此它需要组织培养加工(TC处理）使其表面亲水，便于贴壁细胞附着和生长。
二、常见细胞培养容器
1. 培养皿
特点：该容器较浅，易于操作，适合细胞生长和繁殖。
尺寸：根据底座的直径，常见的名称包括6厘米、10厘米等。
优点：易于观察和选择单个细胞集落。
缺点：开口大，污染风险高。
2. 培养瓶
特点：根据瓶底的表面积命名，如T25（25平方厘米）、T75（75平方厘米）和T175（175平方厘米）。
直颈与曲颈：弯曲的颈部设计更容易操作，防止瓶盖与培养基接触，减少污染。
瓶盖类型：分为滤膜盖（适用于需要CO₂通风的细胞）和密封盖。
优点：适用于大规模细胞培养，污染风险低。
缺点：该操作相对复杂，不适合选择单细胞集落。
3. 多孔培养板
特点：用于细胞克隆、划痕实验、细胞毒性检测等。
常见规格：6孔、12孔、24孔、96孔等。
优点：适合高通量实验，节省试剂和细胞。
缺点：每孔面积较小，不适合大规模细胞培养。
三、常见培养容器的参数对照
以下是常见培养容器的面积、培养液体积及推荐细胞量的对照表：
| 培养容器 | 面积（cm2） | 培养液体积（mL） | 细胞量（个） |
| 96孔板 | 0.32 | 0.1 | 5×104 |
| 24孔板 | 2 | 1 | 2~5×105 |
| 12孔板 | 4.5 | 2 | 5~10×105 |
| 6孔板 | 9.6 | 2.5 | 1~2×106 |
| 3.5cm培养皿 | 8 | 3 | 1~2×106 |
| 6cm培养皿 | 21 | 5 | 2.5~5×106 |
| 10cm培养皿 | 55 | 10 | 6~10×106 |
| 培养瓶 | 25 | 5 | 1~5×106 |
| 培养瓶 | 75 | 15~30 | 1~2×107 |
四、如何选择合适的培养容器？
根据实验需求选择：
大规模培养：选择培养瓶。
高通量实验：选择多孔培养板（如96孔板、24孔板）。
单细胞操作：选择培养皿。
根据细胞类型选择：
贴壁细胞：选择经过TC处理的培养容器。
悬浮细胞：选择未经TC处理的培养容器。
根据培养条件选择：
需要CO₂通气：选择滤膜盖培养瓶。
无菌要求高：选择一次性塑料容器。
五、TC处理
TC（Tissue Culture Treated）处理：贴壁细胞需要依附在支持物表面才能生长，而聚苯乙烯等高分子材料表面是疏水的，不利于细胞贴附，经过特殊处理的培养皿（即TC处理)表面能够变得亲水，适合贴壁细胞的生长，能促进细胞贴壁生长和形态伸展。经过TC处理后，细胞能更稳定地贴附和生长。
非TC（Non-Treated）处理表面处理：未经特殊处理的细胞培养皿表面，一般疏水性较强，适合悬浮细胞的培养。悬浮细胞不需要依附支持物，能在培养液中呈悬浮状态生长。
六、使用注意事项
无菌操作：确保培养容器和培养基无菌，避免污染。
表面处理：贴壁细胞需使用TC处理的容器，悬浮细胞则无需处理。
细胞密度：根据容器面积和推荐细胞量接种，避免过密或过稀。
培养液体积：根据容器规格添加适量培养液，确保细胞正常生长。
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