血清选购和使用注意事项
发布时间：2023-02-15 浏览次数：223
聊聊血清选购和使用注意事项
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Part 01 牛血清分类
胎牛血清FBS，母牛怀孕3-8个月时采血
新生牛血清NCS， 出生10天内
小牛血清BCS，出生后 16-22周
供体血清 成年牛。
Part 02 外观辨别牛血清品质
血清为动物来源，成分复杂，不同批次间会存在一些外观上差别。一般情况下，它们的颜色可能是金黄色、红色、琥珀棕色或者是介于三者之间。
淡黄色/透明：2小时内国产新生牛血清，胆红素含量较少
金黄色/透明：新生牛血清
金黄色/不透明：数天或更久小牛血清
淡黄色微红/透明：进口胎牛血清，如澳洲
淡红色/透明或红色偏深/透明：普通进口胎牛血清，如南美
红色偏暗/透明——普通胎牛血清；保存不好，出现血红蛋白氧化
红色/不透明：进口小牛血清，透明度越差牛龄越大。
Part 03 牛血清的保存及使用
-15℃至-20℃保存。为避免反复冻融，建议无菌分装成一次的用量，-20℃保存，效期内均可使用；
2℃-8℃融化，过程中不时旋转混匀，充分融解后使用或平衡至室温使用，尽快使用完。
出现絮状沉淀，最常见原因之一：融化过程中，各种蛋白如脂蛋白等聚集；一般不会影响产品质量。可400g离心5分钟，取上清，然后过滤。根据需要选择合适的滤膜孔径，常用0.22um PES材质滤膜。为避免阻塞滤膜，建议离心取上清，加入培养基内一起过滤，不要直接过滤血清。
所以建议分装成一次性用量，避免反复冻融。
Part 04 血清是否需灭活或者辐照处理？
灭活过程，会破坏某些成分，如氨基酸，维生素，生长因子等。所以只有特殊要求，会考虑对血清做灭活处理；如实验对血清某种组分敏感，常见需去除补体蛋白，一般免疫学相关研究中及肌细胞和干细胞培养中，需对血清进行灭活处理。
融化混匀后，置于56℃水浴30min热灭活，同时不时旋转混匀血清，30min后建议马上转移至冰上降温。为减少对血清品质影响，一次灭活量不宜过大。
γ射线辐照是灭活血清中病毒，一般情况下，25-40kGy和30-45kGy是常用辐射剂量。
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