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EasyID大肠埃希氏菌O157:H7/NM生化鉴定试剂盒

英文名称:EasylD Biochemical Identification Kit for Escherichia co/i0157:H7/NM

货 号 :HKI006

规 格 :10test

用途:用于大肠埃希氏菌O157:H7/NM的13种生化反应(参考GB 4789.36-2016)

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产品名称:EasyID大肠埃希氏菌O157:H7/NM生化鉴定试剂盒  
英文名称:EasyID Biochemical Identification Kit for Escherichia coli O157:H7/NM

产品编号与包装规格:

编号 规格
HKI00610测试/盒

产品简介:本试剂盒基于一步加样技术,用于大肠埃希氏菌O157:H7/NM的生化鉴定(GB 4789.36)。

产品组分:
      主要组分:EasyID大肠埃希氏菌O157:H7/NM生化鉴定条10条、半固体琼脂10瓶、氧化酶试剂1瓶。
      其它组分:悬浮培养基10瓶、 麦氏比浊管1瓶、靛基质试剂1瓶、无菌液体石蜡1瓶、VP试剂甲液1瓶、VP试剂乙液1瓶、甲基红试剂1瓶、记录表1册、产品说明书1份。

储存条件与保质期:2〜8°C保存,有效期见试剂盒外标签。

EasylD大肠埃希氏菌O157:H7/NM生化鉴定试剂盒使用指南:
      1,从选择性平板上挑取可疑单菌落(需预先确保增菌和分离均符合大肠埃希氏菌O157:H7/NM典型特征)接种于营养琼脂或TSA平板进行纯化;
      2,取鉴定条、悬浮培养基、半固体琼脂,使用前平衡至室温;开启半固体琼脂;
      3,挑取经纯化的分离株新鲜菌苔于悬浮培养基中,制成0.5麦氏浊度的均一菌悬液;同时接种同一菌株于三糖铁琼脂(需另外购买) 和半固体琼脂中;
      4,取小块洁净滤纸(需自备),滴加1滴氧化酶试剂,用无菌玻棒或塑料接种环挑取同一可疑菌落并涂于纸片上,30秒内观察滤纸片颜色,按表3并对照比色卡相关资料可下载EasylD大肠埃希氏菌O157:H7/NM生化鉴定试剂盒产品使用说明书查看记录结果,用完旋紧瓶盖并放回试剂盒并置于2~8 ℃下保存;
      5,从底座上取下鉴定条,并从鉴定条右侧向左掀开贴膜,用移液器小心注入2 mL菌悬液于分液槽中(避免使菌液提前流入反应孔),贴回贴膜,并依次抬起左右两侧数次,使菌悬液液面达同一高度,然后水平托起分液槽端,确保菌液流入各反应孔中,贴紧薄膜并放回底座。再次从右侧掀开贴膜,向第6、7、8号孔中各滴加3~4滴无菌液体石蜡,贴紧薄膜;

鉴定条横截面及操作示意图

      6,将接种的鉴定条和反应管置于36°C±1°C培养养(培养时间按表3);培养完毕, 记录三糖铁琼脂培养结果,按表3并对照比色卡读取鉴定条第1、3~8孔情况并记录结果(相关资料可下载EasylD大肠埃希氏菌O157:H7/NM生化鉴定试剂盒产品使用说明书查看);取下鉴定条并置于365nm紫外灯下,观察第2孔是否有蓝色荧光,然后取出鉴定条置自然光下,掀开贴膜,分别向第9孔滴加2滴靛基质试剂,向第10孔逐滴滴入3滴VP试剂甲液和2滴VP试剂乙液,向第11孔小心滴加1滴甲基红试剂,不贴紧贴膜,反应孔透气10min后,记录结果; 
      7,综合菌落形态和GB4789.36大肠埃希氏菌O157:H7/NM生化试验反应结果(见表2 )进行判读。

表2 GB4789.36大肠埃希氏菌O157:H7/NM生化反应特征

注意事项:
      1,需要使用者自备的试剂及用品有:三糖铁琼脂、洁净滤纸、微量移液器及无菌吸头、生化培养箱等;
      2,所含悬浮培养基为本试剂盒专用,不可替换或用于其他试验;
      3,反应名称加上划线表示接种后培养前需添加配套试剂,反应名称加下划线表示培养结束后添加配套试剂;
      4,甲基红试剂流动性强,滴加该试剂时应特别小心,防止试剂滴入其他的反应孔;未用完的配套试剂应旋紧瓶盖放回包装盒中并置于2〜8°C下保存;
      5,向分液槽中加入菌液后,尽量分散均匀;极个别情况有反应孔分液量接近于100μL,但不影响反应结果;
      6,为避免污染,务必在超净工作台或生物安全柜中进行接种和添加配套试剂,培养前务必贴紧贴膜;
      7,如果鉴定条已过期,或铝箔袋破损,请勿使用;
      8,本说明书需重复使用,请妥善保管。

废物处理:带菌的鉴定条、吸头和悬浮培养基等试验材料应置121 °C下湿热灭菌 30min之后,按医疗垃圾相应的处理方式处理。

执行标准:QS/BHK 0002-2020 Easy ID生化鉴定试剂盒

参考文献:GB 4789.36 食品安全国家标准 食品微生物学检验 大肠埃希氏菌O157:H7/NM检验