一、 技术原理
试剂盒基于多重PCR技术(multiplex PCR)，在阪崎克罗诺杆菌同一PCR反应体系中加入2对引物，于样本中基因组的相应靶位点特异性结合，同时扩增出2条核酸片段的PCR反应，其反应原理，反应试剂和操作过程与一般PCR相同。扩增产物经琼脂糖电泳和紫外仪观察，在目标位置处出现两条特异性条带时，即为阳性结果。
“＋”表示结果为阪崎克罗诺杆菌；“－”表示结果为非阪崎克罗诺杆菌
二、 阪崎克罗诺杆菌双重PCR检测试剂盒组成
组分名称 | 规格×数量 |
干粉试剂 | 8管×3排 |
复溶液 | 600μL×1管 |
阳性对照 | 1管（冻干型） |
阴性对照 | 1管（冻干型） |
裂解液 | 1 mL×1管 |
超纯水 | 1 mL×1管 |
loading buffer | 120μL×1管 |
说明书 | 1份 |
三、阪崎克罗诺杆菌双重PCR检测试剂盒特点
l 高效鉴定：通过同步扩增阪崎克罗诺杆菌的特异靶位基因16s rDNA和外膜蛋白A基因OmpA，实现快速对克罗诺阪崎肠杆菌的鉴定。
l 使用简单：产品试剂盒对反应体系进行冻干粉处理，溶解后加入样品核酸即可进行扩增，减少繁琐的溶液组分配置过程，降低人为操作带来的结果偏差。
l 仪器要求低：具备开展分子生物学实验条件的实验室即可实现操作。
l 鉴定快速：试剂盒使用简单，试验从样品处理到得到结果3h左右即可完成。
l 特异性和灵敏度高：广东环凯微生物科技有限公司拥有丰富的菌种资源库，食源性致病菌菌株超过13000株。凭借丰富的菌株资源，该试剂盒经过了十几种超过300株的标准菌株和分离株的特异性验证，保证了试剂盒的检测特异性，其检验限高达300 CFU/test。
四、双重PCR检测操作流程（全程仅需约3小时） 
五、试剂盒操作示意图 
六、需要配套的仪器及耗材列表
所需的仪器 | 规格 | 备注 |
移液枪、 枪头 | 1-10 μL、10-200 μL和100-1000 μL各一把 | 枪头推荐国产枪头即可。 |
离心机 | 最大转速不低于12,000 rpm，离心机转子支持200 μL和1.5 mL离心管离心。 | 建议用进口离心机。 |
PCR仪器 | 国产或进口产品皆可。 | 能准确提供梯度变温的PCR仪器。 |
电泳仪和电泳槽 | 国产上海天能公司产品、进口Bio-Rad电泳仪 |
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琼脂糖 | 西班牙琼脂糖G-10 | 用于DNA电泳用琼脂糖即可 |
紫外观察仪 | 进口UVITECH、国产紫外观察仪系统 | 需要数据记录需要配有拍摄系统 |
