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OA李斯特氏菌显色培养基(ISO)

英文名称:Agar Listeria according to Ottaviani and Agosti

货 号 :CRM019

规 格 :1000mL/瓶

用途:用于单增李斯特氏菌的计数、分离和确认。

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产品名称:OA李斯特氏菌显色培养基
英文名称:Agar Listeria according to Ottaviani and Agosti

产品编号与包装规格:

产品编号产品类型包装规格
CRM019干粉基础1000mL配制用量/瓶
SR0750(无需额外购买配套试剂5支/盒

产品用途:用于单增李斯特氏菌的计数、分离和确认。

检验原理:蛋白胨、大豆胨和酵母粉提供氮源和微量元素;葡萄糖提供碳源;丙酮酸钠、甘油磷酸镁、硫酸镁、氯化锂促进菌体细胞生长,调节酶活;氯化钠维持均衡的渗透压;磷酸氢二钠为缓冲剂;琼脂是培养基的凝固剂;5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-葡萄糖苷为显色底物,与李斯特氏菌的β-葡糖苷酶发生特异性水解反应,释放出显色基团,使李斯特氏菌属细菌形成绿色菌落;而李斯特氏菌显色培养基配套试剂含卵磷脂和抗生素,可抑制杂菌生长,使具有卵磷脂酶的单增李斯特氏菌在绿色菌落周围形成乳白色脂肪沉淀环。

OA李斯特氏菌显色培养基配方成分:

配方含量(每升)
蛋白胨18.0g
胰蛋白胨(胰酪胨)6.0g
酵母膏粉10.0g
丙酮酸钠2.0g
葡萄糖    2.0g
甘油磷酸镁1.0g
萘啶酮酸0.02g
多粘菌素B76700IU
L-α-磷脂酰肌醇2.0g
硫酸镁(无水)0.5g
氯化钠5.0g
氯化锂10.0g
磷酸氢二钠(无水)2.5g
5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-吡喃葡萄糖苷0.05g
琼脂15.0g
头孢他啶0.02g
环己酰亚胺0.1g
最终pH7.2±0.2

使用方法:称取本品干粉72.1 g,加入950 mL纯化水,搅拌加热至完全溶解(可按比例扩增或缩小),121℃高压蒸汽灭菌15 min,冷至约50℃备用。每支李斯特氏菌显色培养基配套试剂(SR0750)添加10mL无菌纯化水,振荡溶解(可使用涡旋振荡器振荡3-5min),再添加于190mL上述已冷却至50℃左右的基础培养基中,充分混匀后倾注无菌平皿,待凝固,备用。

OA李斯特氏菌显色培养基质量控制(下列质控菌株接种后于35~37℃培养24±3h,观察结果如下表:

指标质控菌株及编号标准值特征性反应
生长率单核细胞增生李斯特氏菌ATCC19115PR≥0.5蓝绿色光滑规则小菌落,周围有乳白色脂肪沉淀环
单核细胞增生李斯特氏菌CMCC(B)54007
特异性英诺克李斯特氏菌ATCC33090——蓝绿色光滑规则小菌落
选择性大肠埃希氏菌ATCC25922G≤1——
粪肠球菌ATCC29212
白色念珠菌ATCC10231

储存条件与保质期:2-8℃,贮存于避光、干燥处。贮存期2年。

参考文献:ISO 11290-1:2017 Microbiology of the food chain — Horizontal method for the detection and enumeration of Listeria monocytogenes and of Listeria spp. — Part 1: Detection method